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农业生物技术学报 2006
转基因产品中pat蛋白的酶联免疫检测, PP. 187-190 Keywords: 酶联免疫检测技术,pat蛋白,转基因产品检测 Abstract: ?建立并优化了转基因油菜(brassicacampestris)中的pat蛋白酶联免疫检测技术。首先通过western杂交和酶活性分析鉴定了pat蛋白的纯度和活性。然后以其为抗原免疫新西兰大白兔制备了pat蛋白的多克隆抗体,并采用硫铵沉淀法和proteina-sepharose4b对其进行了纯化。所得抗体对pat蛋白的检测限为2×10-5mg/ml,且与植物源的几种结构功能相关蛋白均无交叉反应。然后对植物蛋白进行初步提取,应用酶联免疫检测技术对转基因油菜(ms1/rf1andms8/rf3)中的pat蛋白进行了检测,结果表明elisa能高效地鉴别转基因和非转基因油菜.
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