星斑川鲽精子冷冻保存与生理特性分析

？针对星斑川鲽(platichthysstellatus)养殖群体中雄性个体较雌性小，产精液量低，限制了人工繁殖育苗和杂交育种开展等问题，本研究以性成熟的星斑川鲽为实验材料，对精子稀释液成分、稀释液渗透压、激活海水适宜温度和冷冻精液的适宜稀释比例等进行筛选，并用冷冻精液和鲜精分别与星斑川鲽卵进行受精和孵化实验，实验结果利用spss软件中单因素方差分析法和student-newman-keuls进行比较分析。结果表明，利用ts-2(37.65g/l蔗糖+10.01g/lkhco3+1.21g/ltris碱)和sfs-4(60g/l葡萄糖+10.01g/lkhco3+1.21g/ltris碱)冷冻保存的精子活力最高，分别为(56.67±5.78)%和(66.67±5.77)%。利用计算机辅助精子分析(computerassistedspermanalysis,casa)系统对星斑川鲽精子进行分析，测定了用ts-2和sfs-4保存的冷冻精液中精子运动方式的各项参数。结果显示，测定的各项参数(曲线运动速度(curvilinearvelocity,vcl)、直线运动速度(straightlinevelocity,vsl)、平均鞭打频率(beatcrossfrequency,bcf)、运动的直线性(linearity,lin)和运动的前向性(straightness,str)表明，利用sfs-4保存的精子各项运动参数明显高于ts-2。利用蔗糖、khco3和tris碱配制不同渗透压稀释液中，在渗透压为319.94pa时，精子活力最高，为(61.67±5.00)%，与鲜精相比无显著差异(p＞0.05)。利用3~18℃海水激活精子，结果显示，当激活海水温度在12℃时精子活力最高，与鲜精相比无显著性差异(p＞0.05)，而其他温度下显著低于鲜精活力(p＜0.05)。将解冻后的精液稀释10~40倍，与星斑川鲽卵受精，结果显示，在稀释20倍后冷冻精液的受精率最高。本研究利用ts-2+20%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,dmso)和sfs-4+20%dmso对星斑川鲽精子成功进行冷冻保存，为星斑川鲽精子冷冻保存、种质库的建立和应用提供理论和技术依据。