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农业生物技术学报 2009
天祝白牦牛sry基因克隆与原核表达Abstract: ?从天祝白牦牛的基因组dna中扩增了sry(sex-determiningregionontheychromosome,sry)基因编码区序列,将其克隆至pgem-teasy载体并送至生物公司测序,天祝白牦牛sry基因编码区长687bp,编码229个氨基酸;对牦牛和奶牛的sry基因编码区进行序列比对,发现存在2个碱基的变异,造成1个氨基酸的变异;将牦牛sry基因编码区连接至pet-28a(+)载体,成功构建了表达载体pet-28a/sry;把表达载体pet-28a/sry转入大肠杆菌e.colibl21(de3)中,在合适的条件下诱导该大肠杆菌,sry蛋白得到了大量表达;对表达产物进行了western-blot检测,进一步确定牦牛sry蛋白得到表达。
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