h5n1亚型高致病性禽流感病毒a/duck/fujian/01/02株感染性克隆构建

？摘要：1999-2002年本试验室从我国南方健康鸭体内分离到21株h5n1亚型禽流感病毒，对其进行系统地生物学特性和遗传演化分析发现，其中a/duck/fujian/01/02(简dkfj)和a/duck/guangxi/53/02(简dkgx)属于同一基因型,对鸡都呈高致病性，但对哺乳动物模型balb/c小鼠的致病性明显不同:dkgx对小鼠呈低致病性（mld50>106.5），dkgx株反向基因操作系统本试验室已经建立，而dkfj对小鼠呈高致病性（mld50<100.5）。为了研究这两株病毒对哺乳动物模型balb/c小鼠致病性差异的分子机制，本研究构建了对dkfj的8质粒反向基因操作系统，并通过细胞转染技术成功拯救了该病毒（r-dkfj）。r-dkfj在对哺乳动物模型balb/c小鼠的致病性保持了与亲本野生毒（w-dkfj,mld50<100.5）一致的生物学特性，并且对小鼠呈全身感染，即106eid50鼻腔感染小鼠后第三天在脑、脾、肾、肺脏等脏器检测到病毒。dkfj反向基因操作系统的成功建立为阐明h5n1亚型禽流感病毒对哺乳动物模型balb/c小鼠的致病机制等方面奠定了基础。