h5n1亚型禽流感病毒血凝素在昆虫杆状病毒系统中表达与活性鉴定

？：本实验从质粒pgem-ha中扩增h5n1亚型禽流感病毒ha基因，构建转移载体pfastbacht-ha并与e.colidh10bac中的bacmid质粒重组，构建重组转座质粒rbacmid-ha。在脂质体介导下将rbacmid-ha转染sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。在sf9昆虫细胞中表达ha蛋白，通过sds-page、westernblot和血细胞吸附实验鉴定重组蛋白。结果显示重组ha蛋白分子量约为66kda，该蛋白与aivh5亚型鸡血清发生特异性反应，与h7、h9亚型鸡血清不反应，转染重组杆状病毒后的细胞能吸附鸡的红血球，证明ha基因在sf9昆虫细胞中获得了正确表达，不仅具有型特异性，而且有良好的生物反应性。