牛白细胞介素18的原核表达及其生物学活性研究

？将牛白细胞介素18(bovineinterleukin-18,boil-18)的成熟蛋白基因亚克隆到原核表达载体pgex6p-1中，并在宿主菌bl21（de3）中进行表达；用boil-18在昆虫细胞中的表达产物制备的兔多克隆抗体作为一抗进行westernblot分析；采用亲和层析法，对表达产物进行纯化；利用mtt染色法研究重组boil-18（reboil-18）对牛外周血单核细胞(pbmc)增殖的促进作用；采用双抗体夹心elisa法研究reboil-18诱导脾淋巴细胞产生ifn-γ的情况；采用微量细胞病变抑制法检测reboil-18对vsv导致细胞病变的抑制作用。结果:得到了boil-18的高效表达产物，表达量为31.8％，westernblot显示，在44kd处有一特异性条带；纯化后获得了纯度较高的reboil-18蛋白；纯化的boil-18对pbmc增殖具有明显的促进作用，并且能够促进ifn-γ的诱生和抑制vsv病毒的活性。