猪骨髓抗菌肽pmap-37基因片段的克隆及不同体重的表达差异

？从杜长大母猪的股骨骨髓中提取基因组rna，用rt-pcr扩增抗菌肽pmap-37基因，获得1条约282bp的片段，以pgem-teasyvector为载体，将该基因片断克隆到大肠杆菌(escherichiacoli)dh5α中。从筛选的阳性克隆中分离出pmap-37基因，测定其序列。分析表明，该片段为pmap-37cdna的部分序列，编码167个氨基酸组成的多肽。研究得到的基因片段与报道的猪骨髓抗菌肽pmap-37cdna部分序列同源性达到98%。以pmap-37基因片段的克隆为基础，构建了优化的半定量rt-pcr法，以18srrna为内标，研究不同体重猪骨髓抗菌肽pmap-37基因表达的差异。结果发现，从刚出生到20kg，pmap-37基因表达呈上升趋势，在20～40kg，pmap-37基因表达呈下降趋势，40～60kg，pmap-37基因表达又呈上升趋势，在60～90kg，pmap-37基因表达呈下降趋势。