茄子基因组dna提取及issr-pcr反应体系的优化

？为了应用issr分子标记对茄子(solanummelongenal)种资源进行种质鉴定、分类及亲缘关系等方面的研究，本试验以茄子叶片为材料，探索茄子dna的提取及issr反应的最佳体系。结果表明利用改良ctab法提取dna，可以消除茄子叶片多糖、多酚、色素等物质的干扰，得到高质量的dna，完全符合issr反应需要。以茄子基因组dna为模板，通过正交试验设计，从taq酶、dntp、引物、模板4种因素3个水平对茄子issr反应体系进行优化，建立了一套适宜于茄子的issr优化反应体系及程序，为进行茄子遗传多样性的研究奠定了基础。在20μl的反应体系包括：taq酶1u，mg2+2.5mmol/l，dntp375μmol/l,引物浓度0.4μmol/l，模板dna4ng，2μl10×pcrbuffer（mg2+）。