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农业生物技术学报 2007
人促红细胞生成素基因和acgfp1共表达真核表达载体的构建及鉴定Keywords: 促红细胞生成素基因,pires2-acgfp1,cho,山羊成纤维细胞 Abstract: ?:为构建重组人红细胞生成素(hepo)真核表达载体,应用pcr及人工合成方法获得除第一内含子的hepo基因组基因,并将其插入载体pires2-acgfp1,成功构建hepo基因和acgfp1共表达载体phepo-ires-acgfp1,然后用脂质体法使该载体转染中国仓鼠卵巢细胞(cho)及山羊成纤维细胞,于转染后48h在荧263光显微镜下观察到绿色荧光。经g418筛选,在荧光显微镜下发现成簇的绿色荧光细胞,说明重组质粒被成功导入细胞并表达acgfp1,为鉴定hepo转染成功与否及阳性细胞筛选提供了方便。
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