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农业生物技术学报 2007
玉米颗粒结合型淀粉合成酶(gbss)基因cdna的克隆及植物表达载体的构建Keywords: 颗粒结合型淀粉合成酶,基因克隆,定点突变,融合pcr,植物表达载体 Abstract: ?根据已发表的玉米颗粒结合型淀粉合成酶gbss(granule-boundstarchsynthase)基因序列,设计两对引物,其中一对为定点突变的过度引物。从授粉后15d的玉米胚乳中提取总rna,以反转录合成的cdna第一链为模板,首次用定点突变、rt-pcr、融合pcr的方法克隆了gbss基因的全长cdna(1818bp)片段。序列测定表明,该片段与文献报道的序列具有99.72%的同源性。并构建了以胚乳特异表达性的gt1为启动子,以nos-ter为终止子的植物表达载体pbi-gt1-gbss,其含有npt‖选择标记基因。以期实现特定时期gbss基因在玉米胚乳中的大量表达。
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