猪前体脂肪细胞与肌卫星细胞体外联合培养的初步研究

？目的：初步建立猪前体脂肪细胞与肌卫星细胞体外联合培养的方法，探讨联合培养模式下两类细胞的基本生长特性。方法：利用差速贴壁法分别纯化前体脂肪细胞与肌卫星细胞，按1：10的浓度比接种混合培养，以单独两类细胞培养作对照；采用油红o染色、desmin免疫组化染色鉴定；通过形态学观察、mtt比色绘制生长曲线研究细胞生长规律。结果：desmin免疫组化染色观察肌细胞阳性率达97%以上，油红o染色计数诱导分化细胞比率大于60%；形态学观察发现，联合培养细胞接触汇合前形态呈梭形，接触后不规则重叠交织生长；充脂细胞呈现较晚，且数量稀少；he染色可见多核细胞融合及肌管样结构；测定2～9d细胞生长曲线显示，联合细胞组增殖比率大于对照组，经历2～3d潜伏期、3～7d指数生长期后，并未与对照组同步进入平台期，而呈持续缓慢上升趋势。结论：初步实现了体外猪前体脂肪细胞与肌卫星细胞的直接联合培养，并由研究结果显示其与对照组生长特性存在差异。