槲皮素对四氯化碳致建鲤肝细胞损伤的保护作用

？本研究旨在探讨槲皮素(quercetin,qc)对化学性肝细胞损伤的保护作用。1，1-二苯基-2-苦基苯肼基自由基(1,6-bis(diphenylphosphino)hexane,dpph)在本实验中用来测定槲皮素的自由基清除能力。8mmol/l四氯化碳(ccl4)用作体外诱导剂，构建建鲤(cyprinuscarpio)肝细胞损伤模型。原代培养的肝细胞分别用不同浓度的槲皮素(0.05、0.1和0.2mg/ml)进行前处理，后处理及前后处理，检测培养上清指标酶((谷草转氨酶(aspartatetransaminase,got)、谷丙转氨酶(alaninetransaminase,gpt)、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenas,ldh))及超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,sod))的酶活性及丙二醛(malondialdehyde,mda)的释放量，实时荧光定量pcr(real-timequantitativepcr,qrt-pcr)法测定细胞中细胞色素p4501a(cyp1a)、3a(cyp3a)及白细胞介素-1β(il-1β)、白细胞介素-6(il-6)及诱导型一氧化氮合酶(inos)mrna表达量，westernblot测定核转录因子-κb(nf-κb)成员c-rel和p65的蛋白表达量。结果显示，低浓度的qc即可高效地清除dpph，表明qc具有较强的自由基清除能力。qc可以显著提高细胞活力及sod活性，且有效地降低了got、gpt、ldh和mda的含量；同时，qc也显著地抑制了cyp1a和cyp3a的表达，对c-rel和p65及其下游细胞因子的转录也起到了显著的抑制作用。数据统计分析显示，前处理组效果最佳，前后处理组效果次之，后处理组稍差，各组中0.1和0.2mg/ml槲皮素的抑制效果最明显。综合以上结果，qc对建鲤化学性肝损伤有一定的保护作用。实际生产中，可将槲皮素开发成一种饲料添加剂，以增加水产动物的抗病能力。