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农业生物技术学报 2015
安祖花arizona品种遗传转化体系的优化及矮牵牛查尔酮合成酶基因(phchs)的导入, PP. 281-290 Keywords: 安祖花,遗传转化,抗性愈伤组织形成率,矮牵牛查尔酮合成酶基因(phchs) Abstract: ?安祖花(anthuriumandraeanum)是近年来非常流行的年宵花卉之一。为了优化安祖花的遗传转化体系,本研究以安祖花arizona品种组培苗的叶片为外植体,将构建好的重组质粒psn1301-hyg-phchs在根癌农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)gv3101介导下转化安祖花。优化后的体系为:首先将组培苗幼嫩叶片切块后置于1/3ms预培养基(附加200mg/lnh4no3,0.5mg/lba,0.05mg/l2,4-d,5g/l琼脂,30g/l蔗糖)中预培育3d,然后用根癌农杆菌(菌液od600=0.5)侵染10min,将侵染过的叶片接种于ms培养基,28℃黑暗条件下共培养3d,之后转移到附加有500mg/l羧苄青霉素和30mg/l潮霉素的愈伤诱导培养基中进行筛选。结果表明,抗性愈伤组织形成率可达到5%~6%。对体系优化过程中获得的14株抗性转基因植株进行pcr检测,其中9株为阳性,证实矮牵牛查尔酮合成酶基因(petuniahybridachalconesynthasegene,phchs)已经转入安祖花arizona中。该研究结果为利用转基因方法改良安祖花品种提供了技术保障。
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