西农萨能奶山羊脂联素受体1基因(adipor1)cdna克隆、表达及功能分析

？脂联素(adiponectin)具有改善胰岛素敏感性，调节脂肪酸代谢和参与细胞增殖和分化的功能。本研究参考genbank中已收录的牛(bostaurus)、小鼠(musmusculus)和人(homosapiens)等物种脂联素受体1基因(adiponectinreceptor1,adipor1)序列的同源比对结果，设计和合成pcr扩增引物，采用反转录pcr和race技术，分离并克隆了西农萨能奶山羊(caprahircus)adipor1的cdna序列。结果显示，adipor1全长2032bp(genbank登录号:hq846828)，包括开放阅读框(openreadingframe,orf)1128bp，3'非翻译区(untranslatedregions,utr)719bp和5'utr185bp，该基因编码375个氨基酸。通过氨基酸序列比对发现，山羊与牛、猪(susscrofa)、小鼠和人的adipor1相似性较高，均在95%以上。蛋白质结构分析表明，其蛋白质的分子量为42.44kd，等电点为7.19，含7个跨膜结构域，并且整个序列中不含信号肽。组织表达分析显示，该基因在肺中的表达量最高，小肠次之，在心脏中表达量最低，而其余8个组织中adipor1mrna水平变化则比较平缓；奶山羊乳腺组织中adipor1表达量分析表明，adipor1的表达量在干奶期和泌乳盛期乳腺组织差异显著(p＜0.05)。用不同浓度胰岛素(insulin)和催乳素(prolactin)处理奶山羊乳腺上皮细胞，结果发现，用胰岛素处理乳腺上皮细胞后，adipor1的表达量下调，在胰岛素浓度为50nmo/l时效果最明显(p＜0.01)；用催乳素处理乳腺上皮细胞后，adipor1的表达量上升，在浓度为100mg/ml时作用最明显(p＜0.05)，表明该基因在奶山羊乳腺上皮细胞中具有一定的调控作用。本研究为进一步揭示adipor1基因在奶山羊乳腺组织中的功能提供基础资料。