抗亚洲玉米螟、抗草甘膦转基因玉米的培育

？5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶基因(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphatesynthase,epsps)是一个高抗草甘膦的基因，苏云金芽胞杆菌(bacillusthuringiensis)的杀虫蛋白基因(bt基因)cry1acm是一个能在单子叶植物中高效表达的抗亚洲玉米螟基因。为了获得具有抗虫、抗除草剂优良复合性状的转基因玉米，本研究构建出质粒pcambia1302-p35s::epsps-tnos-pubi::cry1acm-tnos，通过农杆菌(agrobacteriumtumefacien)介导的玉米(zeamays)茎尖遗传转化法将目标基因转入玉米。通过分子检测、草甘膦抗性筛选和田间接种亚洲玉米螟(ostriniafurnacalis(guenée))试验筛选出转基因株系，在此基础上进行了转基因植株室内抗亚洲玉米螟试验和田间草甘膦抗性分析，并采用rt-pcr检测和westernblot方法确定了抗虫蛋白在转基因植株中稳定表达。从大量转基因株系中优选出6个遗传稳定且抗亚洲玉米螟、抗除草剂草甘膦的转基因玉米株系，这些株系的抗亚洲玉米螟、抗草甘膦特性完全满足大田应用的需求。综上所述，将改造后的bt抗虫基因cry1acm和抗草甘膦基因epsps一同转入玉米，赋予两种玉米骨干自交系植株抗玉米螟、抗草甘膦特性，为我国抗亚洲玉米螟抗草甘膦转基因玉米的大面积推广培育出了优良自交系。