rho相关蛋白激酶抑制剂y-27632对猪诱导多能干细胞冻存和传代效率的影响

？猪作为重要的疾病模型动物，目前猪诱导多能干细胞(ips细胞)已有建系，但是细胞的冻存和传代的效率较低，影响后续的实验研究。rho相关蛋白激酶(rock)抑制剂y-27632可提高人胚胎干细胞的解冻存活率，促进其克隆形成。本实验以猪(susscrofa)ips细胞为研究对象，通过在猪ips细胞冻存和解冻过程中添加y-27632，发现其可以减少猪ips细胞在冻存和解冻复苏过程中的凋亡。在细胞的传代过程中，使用y-27632可以促进猪ips细胞的贴壁和克隆形成。虽然高浓度y-27632会对猪ips克隆的形态产生一定的影响，但并未影响细胞的碱性磷酸酶(ap)活性和多能性基因oct4、sox2和nanog的表达水平。最后将转座子报告质粒pb[act-rfp]ds导入猪ips细胞中，经流式筛选后得到的带有红色荧光的细胞，并将其注射于猪孤雌胚胎中进行发育能力检测，发现y-27632的处理能减少细胞在流式筛选和胚胎注射中的凋亡，促进其在胚胎内的嵌合发育。研究结果说明，rock抑制剂y-27632可以提高猪ips细胞冻存和传代的效率，促进其在胚胎中的嵌合。该研究有助于猪ips细胞及其他多能干细胞的保存，传代和筛选等相关研究