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农业生物技术学报 2012
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌缺失毒素1激活基因c(apxic)同时嵌合副猪嗜血杆菌外膜蛋白p2基因(ompp2)复合突变株的构建, PP. 627-635 Keywords: 胸膜肺炎放线杆菌(app),毒素ic基因(apxic),副猪嗜血杆菌(hps),外膜蛋白p2基因(ompp2),复合突变株 Abstract: ?猪胸膜肺炎放线杆菌(actinobacilluspleuropneumoniae,app)以及副猪嗜血杆菌(haemophilusparasuis,hps)是引起猪发病的2种病菌。本研究以app血清5型分离株(sw1)为基础材料,通过构建重组转移载体pboskδic-1和pboskδic/ompp2,构成卡那霉素抗性基因(kanr)和枯草芽胞杆菌(bacillussubtilis)的果聚蔗糖酶基因(sacb)的正负双向筛选表达盒,并筛选获得sw1株缺失毒素i的激活基因c(apxic),同时嵌合hps外膜蛋白p2基因(ompp2)的复合突变株sw1δapxic/ompp2。该突变株经鉴定,与sw1亲本株相比,其缺失了大小为475bp的apxic基因,同时嵌合有大小为1107bp的hpsompp2基因,其基本生长特性与亲本株(sw1)没有显著区别;同时在体外,连续传代10代之后缺失的apxic基因不会发生回复突变,嵌入的ompp2基因仍能够稳定遗传。本研究成功构建了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌缺失apxic基因并嵌合有hpsompp2基因复合突变株,为今后研究app和hps新型二联疫苗打下基础
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