对根结线虫高毒力芽胞杆菌的鉴定及其活性测定

？为筛选高效安全的杀虫资源，从海底淤泥中分离到一株对根结线虫(meloidogynespp.)高毒力的芽胞杆菌ybf-10，pcr扩增16srran基因，经测序、序列比对分析和系统进化树构建，发现其与坚强芽胞杆菌(bacillusfirmus)z1-7菌株16srdna同源性为99%，初步确定所分离的菌株为坚强芽胞杆菌。将该菌株培养至芽胞成熟，离心取上清，10倍稀释后进行生物测定，发现其对北方根结线虫二龄幼虫有很高的毒力。处理24h校正死亡率达到50%以上，72h达到100%。对根结线虫虫卵进行毒力测定表明，作用48h后能显著抑制虫卵孵化达到80%以上。在培养过程中分不同时段取样，并用所取样品上清进行生物测定，发现从稳定期开始表现出了对北方根结线虫的毒力，在整个稳定期毒力持续增强，直到衰亡期后期，毒力达到最高，表明坚强芽胞杆菌所产生的杀线虫活性物质主要是在稳定期合成的。将发酵上清80℃处理30min毒力无明显变化，通过饱和硫酸铵沉淀上清中蛋白，该蛋白对线虫无明显毒力，但是去蛋白后的上清对线虫仍然具有与未经处理上清相似的杀线虫活性，表明坚强芽胞杆菌产生的杀线虫活性物质是一种非蛋白类的小分子化合物。研究结果提示，本研究所分离的坚强芽胞杆菌在稳定期能够大量合成对线虫具有毒杀活性的小分子化合物，对根结线虫表现出极高毒力，为利用该菌株开发植物寄生线虫生防制剂提供了杀虫资源。