慢病毒介导shrna干扰颗粒体蛋白前体(grn)促进猪前体脂肪细胞分化

？为研究颗粒体蛋白前体(granulin,grn)在脂肪细胞发育过程中的作用，本实验构建了grn短发夹rna(shorthairpinrna,shrna)慢病毒干扰载体，包装并感染猪前体脂肪细胞，采用油红o染色、油红o提取比色法检测猪前体脂肪细胞分化情况，采用real-timepcr法检测成脂关键基因mrna的表达变化情况。结果显示，grn慢病毒干扰载体病毒滴度在5×107tu/ml以上，病毒感染前体脂肪细胞后显著降低了grn的表达，shrna2干扰效率最高，达到76%，沉默grn后能够促进猪前体脂肪细胞分化；脂肪细胞分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(pparγ)、固醇调节原件结合蛋白(srebp-1c)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(ap2)和脂蛋白酯酶(lpl)基因mrna表达量均升高。结果表明，降低grn基因表达促进了猪前体脂肪细胞分化，揭示grn在猪前体脂肪细胞分化过程中可能起到抑制作用