白菜nac转录因子brccuc3基因克隆及其对叶缘和主枝发育的影响

？摘要植物nac转录因子cup-shapedcotyledon（cuc）亚家族成员在植物茎尖分生组织形态建成、器官边界分离、叶发育方面发挥着重要作用。采用基因同源克隆的方法获得了白菜基因brccuc3，并转化拟南芥做了初步的功能鉴定。研究结果表明，白菜brccuc3的编码区长1008bp，编码335个氨基酸，基因结构分析显示brccuc3包含3个外显子、2个内含子，内含子剪接位点符合gt-ag规则。氨基酸序列分析表明，brccuc3蛋白具有典型的植物nacdomain结构域。brccuc3编码区氨基酸序列与其它植物的cuc3蛋白有很高的一致性，尤其与甘蓝、萝卜、拟南芥cuc3蛋白高度一致，一致性分别达到98%，97%，83%，在不同物种cuc3的系统进化树上，brccuc3归属于双子叶植物分支的十字花科亚组，由不同植物20条cuc3编码区氨基酸序列所建立的系统进化树与真实的植物进化基本一致。荧光定量pcr分析结果表明brccuc3在白菜叶深裂株系叶片中的表达量比叶全缘叶片中的高。利用根癌农杆菌浸花法转化拟南芥，获得了转brccuc3基因的拟南芥植株。过表达brccuc3的转基因拟南芥呈现叶缘出现裂刻、主枝增加的新表型。初步说明该基因参与叶形和主枝的发育调控。