转红色荧光蛋白基因唐鱼肌肉中抗生素标记基因(nptⅱ)检测和表达量分析

？为了获得有特色的观赏鱼，本实验室在2003年将含有海葵红色荧光蛋白基因的表达载体(同时含有标记基因新霉素磷酸转移酶基因(nptⅱ))转入唐鱼(tanichthysalbonubes)的受精卵，获得转红色荧光蛋白基因唐鱼，对其外源标记基因nptⅱ的表达产物和存在时间进行分析，为评价转基因鱼的生物安全提供依据。本实验对转基因唐鱼和非转基因唐鱼肌肉中抗生素标记基因(nptⅱ)进行pcr检测和nptⅱ表达产物的免疫检测试剂条检测，结果显示，转基因唐鱼检测到nptⅱ基因和表达产物，而非转基因唐鱼中均没检测到该基因和表达产物存在。同时在唐鱼死亡后(水温20~25℃)，应用酶联免疫吸附测定法(elisa)对死亡0(鲜活肌肉)、24、48、72、96、120和144h组的转基因唐鱼肌肉中nptⅱ蛋白的含量进行定量检测，结果表明，转基因唐鱼鲜活肌肉中nptⅱ蛋白在肌肉中的含量为9.12ng/g，随着转基因唐鱼死亡时间增加肌肉中nptⅱ蛋白含量逐渐减少，死亡96h组转基因唐鱼肌肉中nptⅱ蛋白已经接近为0。结果表明，转基因唐鱼肌肉中nptⅱ蛋白在自然环境中容易降解，推测其对环境安全隐患相对较低。