猪生长抑素ⅱ型受体基因(sstr2)shrna的构建与筛选

？生长激素(gh)是调控动物生长的重要激素，gh分泌水平的高低主要受正性调控因子生长激素释放因子(grf)和负性调控因子生长抑素(ss)的双向调节。ss通过生长抑素受体(somatostatinreceptor,sstr)发挥作用，减少gh的分泌水平。本研究设计了3条sstr2的短发夹rna(shrna)，构建猪(susscrofa)sstr2真核表达质粒(pcdna3.1(-)-sstr2)和sstr2慢病毒rna干扰质粒(pshrna-copgfplentivector,lv-shrna)，并共转染中国仓鼠(cricetulusgriseus)卵巢细胞系(cho)，通过对转染细胞的荧光观察、real-timepcr和酶联免疫法(elisa)检测，结果表明，cho转染细胞中猪sstr2mrna表达水平不同程度的抑制，分别为90.4%、28.3%和86.3%，(p<0.05)。其中，lv-shrna1表现出最高的沉默效率：转染效率在80%左右时，猪sstr2mrna水平沉默效率为90.4%，蛋白质水平降低了33.3%。本研究成功地筛选到了降低猪sstr2基因表达的shrna，为利用shrna技术下调动物基因表达，构建转基因模型提供思路。