一株野禽新城疫强毒分离株的分子特性及其对不同宿主的致病性

？新城疫(newcastledisease,nd)是禽类的两大疫病之一，新城疫病毒(newcastlediseasevirus,ndv)是该病的病原体。为了解野禽ndv的分子特性、致病性及其与家禽ndv之间的关系，2011年分离到一株野禽ndv，将其命名为ndv2；通过标准生物学毒力检测证实其为强毒株。参照genbank发布的ndv全长基因序列设计9对特异性引物，对ndv2进行全基因的序列测定和分析。拼接后序列分析表明，ndv2株的全基因组序列总长为15192nt，包含6个开放阅读框，分别编码6种蛋白nucleocapsidprotein(np)、phosphoprotein(p)、matrixprotein(m)、fusionprotein(f)、haemagglutinin-neuraminidase(hn)和largeprotein(l)的基因，长度分别为1753、1451、1241、1792、2004和6703nt(genbank登录号:kf306265)。与国内多数禽源分离毒株相似，ndv2毒株亦属于classⅱ、基因ⅶ型。综合各个蛋白的同源性比较，ndv2株与近年国内流行的一些基因ⅶ型毒株如：egret.gx.11、duck.wf.00、goose.gd450.11等的同源性较高，远高于其他地区和其他基因型的毒株，这说明ndv2毒株与国内的野毒株亲缘性较高；与ndv2同源性差距最大的为classⅰ的js10毒株。f基因的裂解位点显示：全基因长度为15192nt的毒株(包括ndv2毒株在内)在裂解位点处的氨基酸序列为rrqkrf或krqkrf，为强毒株序列。从基因分型结果来看，ndv2毒株和绝大多数参考毒株f基因和hn基因分型结果是一致的；唯一不同的就是印度鸡源分离株ndv4毒株，f基因分型它属于ⅱ型，hn基因分型它属于ⅶ型。分析各个基因的起始序列和终止序列后发现：ndv2株与其它参考ndv毒株的各个基因的起始序列完全相同，说明各基因起始序列保守性较高；不同之处是ndv2毒株f和hn基因的终止序列与lasota和sweden95一致，与其他野禽毒株不同。以ndv2人工感染无特定病原(spicificpathogenfree,spf)鸡(gallusgallus)、鸭(anasplatyrhynchosplatyrhynchoslinnaeus.)和鸽(rupestrispallas)，并且每个攻毒组设同居感染组；来观察ndv2毒株对不同宿主的致病性。结果表明，ndv2毒株均可引起3种攻毒动物发病，剖解后肠道、腺胃、气管等处有淤血、出血现象；而且病毒对鸡和鸽的致病性明显高于鸭。同时ndv2毒株可引起50%同居鸡和20%同居鸽感染发病，不能引起同居鸭发病。本研究为ndv的遗传变异特征和致病规律等方面提供基础资料。