鸡胚性分化早期性别差异表达mirnas的表达谱分析

？为研究microrna(mirna)在鸡胚早期性分化过程中的表达，探讨mirna在性腺早期发育中的作用，本研究从前期以3.5~6.5d的雌、雄鸡(gallusgallus）胚胎性腺为材料的mirna芯片表达谱中筛选出6个性别差异表达的mirnas(其中mir-551b和mir-612为鸡新mirnas），采用rna加尾以及引物延伸的半定量rt-pcr方法研究这些差异表达mirnas在3.5~6.5d雌、雄鸡胚性腺中的表达，并验证其中新mirnas的茎环前体结构。rnafolding软件折叠结果表明，预测的鸡mir-612和mir-551b均具有茎环状的前体结构。半定量结果表明，这6个mirnas均存在不同程度的性别差异表达。除4.5d外，gga-mir-612和gga-mir-1456在其它检测时期的表达为雌性高于雄性；在4.5~6.5d鸡胚性腺中，gga-mir-551b在雄性中表达显著高于雌性(p<0.05)；gga-mir-126在3.5和6.5d雌性性腺中的表达低于雄性，而4.5和5.5d则相反；gga-mir-1599在所检测时期中均为雄性中高表达且在4.5d达极显著水平(p<0.01)，gga-mir-10b的表达与之相反。根据表达谱结果推测gga-mir-551b以及gga-mir-1599可能涉及早期鸡胚性腺发育过程。