玉米in5-2启动子功能区域在洋葱瞬时表达系统中的分析

？本研究旨在通过对根癌农杆菌侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米in5-2启动子的功能区域的分析中，明确in5-2启动子的乙酰苯胺类化合物诱导元件的具体位置。在本研究中采用根癌农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)侵染洋葱(alliumcepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(gus)基因的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(as)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对gus基因的瞬间表达的影响。结果显示，在od600值为0.8的农杆菌液中感染15min,共培养3d,能够得到较高的gus基因瞬间表达，从而建立了一种新的瞬间表达系统。同时，构建了含不同长度的玉米(zeamays)in5-2启动子片段缺失载体，利用新的瞬时表达系统分析其功能区域，推测出乙酰苯胺类化合物诱导元件位于atg上游-220~-143bp之间。结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析。