小鼠干扰素应答基因(ifrg15)的克隆、原核表达及其融合蛋白的亲和纯化

？为研究一个可能的干扰素应答基因(interferonresponsivegene15,ifrg15)所编码蛋白质的生物学功能，对昆明小鼠(musmusculus)基因组dna进行pcr扩增获得ifrg15(393bp)，并将其克隆到pgem-t载体，经测序鉴定后用ecorⅰ和xhoⅰ酶切下ifrg15基因片段并和双酶切后的表达载体pet-41(c)进行连接，然后转化入大肠杆菌(escherichiacoli)bl21(de3)感受态细胞。对重组克隆用iptg诱导融合蛋白的表达，并进行分离纯化。结果表明，本实验在e.colibl21(de3)菌株中成功地高效表达、并在变性亲和层析条件下成功纯化了gst&6xhis-ifrg15融合蛋白。