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农业生物技术学报 2013
sleepingbeauty(sb)转座子介导增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)体内转染鸡胚胎, PP. 137-147 Abstract: ?为了探索转座子介导技术在鸡胚中的转染效果,本研究采用鸡蛋开窗法将sleepingbeauty(sb)单质粒转座载体pt2-sv40-egfp-sb11注射至孵化36h鸡(gallusdomesticus)胚盘中,同时设开窗不注射组和不开窗组。利用体视荧光显微镜和rt-pcr方法检测增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)表达率,并比较不同阶段的胚胎成活率、孵化率以及蛋重变化。结果表明,egfp在鸡胚胎中获得较高的表达率(40%~89%);开窗组和不开窗组在胚胎发育早期蛋重变化差异不显著(p>0.05),而后期开窗注射组的蛋重比例显著低于不开窗组(p<0.05);三组胚胎的成活率和孵化率在整个发育过程中变化显著(p<0.05)。本实验初步证明了经改良的鸡蛋开窗法可用于鸡胚转基因研究,并初步建立了sb转座子介导外源基因在鸡胚中转染方法。
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