小鼠体型控制相关microrna-200b(mir-200b)的表达谱及靶标分析

？microrna-200b(mir-200b)具有类似的调控哺乳动物体型大小的功能，但尚未在哺乳动物个体上进行验证。为研究microrna-200b在小鼠发育过程中的表达，探讨microrna-200b及其靶标基因在小鼠体型发育调控中的关键作用，本研究从小鼠(musmusculus)基因组中扩增得到mir-200b前体序列，并验证了该mirna的茎环前体结构；采用生物信息学软件预测mir-200b可能的靶基因，并通过双荧光素酶报告载体系统验证了mir-200b与靶基因3'utr的相互作用；通过荧光定量pcr技术分别分析了mir-200b在成年小鼠体内各组织中和mir-200b及其靶标基因在小鼠胚胎发育不同时期的表达变化。结果显示，克隆到的鼠mir-200b前体序列能够形成茎环结构；软件预测和细胞实验证实fog2基因是mir-200b的靶标基因，且二者在小鼠胚胎发育第10.5天到第15天时表达呈负相关趋势；qrt-pcr结果表明，mir-200b在成年雌性小鼠各组织中均有表达，在肌肉、肾脏和子宫中表达量高，在心脏、脾脏和肺脏中表达量偏低。根据表达谱和靶标验证结果推测，mir-200b通过与靶基因fog2的互作参与小鼠胚胎发育过程。