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农业生物技术学报 2010
19-去甲睾酮人工抗原及免疫学特性, PP. 911-916 Keywords: 19-去甲睾酮,半抗原,人工抗原,免疫学特性,鉴定 Abstract: ?合成19-去甲睾酮(19-nt)人工抗原,并进行免疫学特性鉴定。丁二酸酐法衍生化19-nt,制备17β-19-nt琥珀酸酯半抗原,其质谱和核磁共振nmr谱表明合成成功。分别用edc法和混合酸酐法将半抗原与bsa(bovineserumalbumin)和ova(ovalbumin)偶联,制备免疫和检测抗原,并进行紫外扫描和红外光谱鉴定,nt与bsa偶联比为18∶1。用nt-bsa免疫balb/c小鼠(musmuscalus)制备nt多克隆抗体,间接elisa效价达到1∶25600。间接竞争elisa的ic50为27.3ng/ml,线性检测范围为3.3~225.0ng/ml,最低检测限为1.6ng/ml。纯化后的抗体与17α-去甲睾酮的交叉反应率为69%,与其它激素的交叉反应率均<0.05%。制备的抗体灵敏度高、特异性强,为试剂盒和试纸条的研制提供基础资料。
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