一株短短芽胞杆菌中羟苯乙酯高效液相色谱(hplc)分析

？短短芽胞杆菌(brevibacillusbrevis)fjat-0809-glx是广谱生防菌。羟苯乙酯是该菌株发酵液中主要功能成分之一，为了建立一种快速、简单、有效的纯化分离方法对其进行定量检测，本研究建立了测定短短芽胞杆菌fjat-0809-glx发酵液羟苯乙酯的高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography,hplc)法。以甲醇∶水(65∶35)作流动相洗脱，在波长254nm进行检测，进样量为10μl。结果表明，羟苯乙酯在1.0~20μg/ml的范围内呈良好的线性关系，相关系数达0.9987，最低检测浓度为1.0×10-15μg/ml。将营养琼脂(na)培养基发酵液提取的羟苯乙酯样品，在不同时间进行检测，结果表明，48h内出峰时间和峰面积稳定，说明该方法在48h内检测检测发酵液均比较稳定。添加不同水平羟苯乙酯的回收率在96.2%~105.3%之间，平均相对标准偏差(relativestandarddeviation,rsd)为0.8%，回收率较稳定。利用优化发酵培养基培养短短芽胞杆菌fjat-0809-glx，经该方法检测显示，其羟苯乙酯出峰时间为3.12min，峰面积为136。根据标准曲线计算得出该发酵液中羟苯乙酯含量约为2.111μg/ml。该方法简便、快速、灵敏度高，可用于短短芽胞杆菌fjat-0809-glx发酵液羟苯乙酯的检测分析。本研究结果为短短芽胞杆菌功能成分的追踪检测奠定基础。