云纹石斑鱼心脏细胞系的建立与鉴定

？鱼类细胞系在鱼类病毒学及功能基因组学方面发挥着重要作用。云纹石斑鱼(epinephelusmoara)是一种具有重要养殖价值的海水鱼类，尚未见细胞系建立的报道。本研究以云纹石斑鱼的心脏组织为材料，建立了云纹石斑鱼心脏细胞系(epinephelusmoaraheartcellline,emh)。细胞系所用的培养基是在l15基本培养基中添加了hepes(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonicacid)，抗生素，胎牛血清(fetalbovineserum,fbs)，β-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-me)和碱性成纤维生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bfgf)的完全培养液。emh细胞已传至20多代，由成纤维样细胞和上皮样细胞组成。本研究检测了温度及fbs浓度对emh细胞生长的影响。emh细胞在18~30℃能正常生长，其最适生长温度为30℃，在36℃时不能正常生长。fbs浓度在10%~20%细胞均能快速生长，最适fbs浓度为15%。染色体分析表明，具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为62%。用脂质体法将含增强绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,egfp)基因的质粒载体pegfp-n3转入emh细胞后，egfp成功表达。emh细胞系的建立将为病毒的分离、鉴定和功能基因的研究奠定基础。