以木糖作为筛选剂的花生子叶外植体遗传转化

？目前在植物遗传转化过程中常用的抗生素类标记基因可能存在潜在的安全隐患，因此探讨使用安全筛选剂替代抗生素类筛选剂便成为植物遗传转化筛选的新途径。本研究构建了同时含有花生(arachishypogaeal.)β-1,3葡聚糖酶基因启动子(ah-glu-p)以及大肠杆菌木糖异构酶基因(xyloseisomerasegene,xyla)的安全表达载体pcambia1301-xyla-ah-glu-p。利用农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)介导法将pcambia1301-xyla-ah-glu-p转化花生子叶外植体，利用木糖作为筛选剂进行筛选,当培养基中蔗糖浓度为10g/l、木糖浓度为20g/l时，外植体再生率为16.1%，再生苗阳性率达到78.4%，转基因阳性植株经嫁接驯化后移栽田间，存活率达74.5%。该转化方法以花生子叶作为外植体、利用木糖作为筛选剂进行筛选，与利用其他外植体进行转化及抗生素筛选相比较,具有操作简单快速、安全无污染以及转化效率高的特点，是一种安全、高效的遗传转化方法。