普定高脚鸡甲状旁腺激素相关蛋白基因pthrp多态性及组织差异表达分析

？为揭示普定高脚鸡甲状旁腺激素相关蛋白基因(parathyroidhormone-relatedpeptidegene,pthrp)的遗传多样性及其在各组织中的差异表达，本实验以贵州省特有的高脚鸡为实验材料，矮脚鸡和百宜黑鸡作对比，利用dna池、单链构象多态性(singlestrandconformationpolymorphim,sscp)和dna测序技术对高脚鸡pthrp进行了多态位点检测；采用实时荧光定量pcr技术对pthrp在高脚鸡、矮脚鸡和百宜黑鸡的心脏、肝脏、胸肌、腿肌中的差异表达进行了分析。结果表明，高脚鸡pthrp在第3外显子209bp处发生了c→t突变，为同义突变，sscp检测出3种基因型cc、ct和tt，相关分析显示c209ｔ多态位点对高脚鸡胫长具有显著影响，且ct基因型个体胫长均显著高于cc和tt基因型个体(p＜0.05)，经χ2适合性检验表明高脚鸡群体呈现中度多态(pic=0.350)，并处于hardy-weinberg平衡状态(p＞0.05)；rt-pcr检测显示pthrp在高脚鸡腿肌中表达量最高，且显著高于其他组织(p＜0.05)；在与矮脚鸡、百宜黑鸡比较中，高脚鸡各组织中的表达量均高于百宜黑鸡相应组织表达量(p＜0.05)，但均低于矮脚鸡相应组织表达量(p＜0.05)。研究结果提示，pthrp基因多态性与高脚鸡胫长显著相关，可尝试用ct基因型为筛选高脚鸡胫长的分子标记辅助选择，且pthrp的表达量在一定程度上对鸡胫骨长度具有影响作用。