铁皮石斛转录因子基因(dowrky2)的克隆与表达分析

？wrky转录因子是近年来在植物中发现的新型转录调控因子，调控植物生长发育和代谢等生理过程。本研究从铁皮石斛(dendrobiumofficinale)中克隆得到出一个新的wrky转录因子dowrky2(genbank登录号:kf953910)，其全长cdna为1309bp，开放阅读框(orf)为999bp，编码一个由332个氨基酸组成的多肽，结构域具有典型的wrky家族结构特征，有4个β-折叠。生物信息学分析表明，dowrky2与海枣(phoenixdactylifera)的pdwrky17相似度最高，为66%；同时，具有特殊的harf基序以及系统进化树聚类分析都表明，dowrky2属于ⅱd亚族，与atwrky11和atwrky17的进化关系最近。蛋白原核表达证实其可以在大肠杆菌(escherichiacoli)中稳定表达。实时荧光定量pcr分析表明，dowrky2在铁皮石斛根、茎、叶和类原球茎中均有表达，其中，在叶中表达量最高，相对表达量依次为叶＞类原球茎＞根＞茎；且响应茉莉酸甲酯(meja)和壳聚糖(chitosan)诱导，分别在4和1h，表达量达到最高峰。本研究结果为后续深入研究该基因的功能提供基础材料。