sirna沉默p62基因对人肝癌细胞hep3b的生物学影响

？【】目的：应用sirna沉默人肝癌细胞hep3b中p62基因的表达，探讨p62基因对人肝癌细胞的生物学影响。方法：人肝癌细胞hep3b为靶细胞，sirna通过lipofectamine2000转染hep3b。首先从3条sirna序列中筛选出1条沉默p62最佳的序列。然后将细胞分为空白对照组、sirna组、ncontrol（nc）组、脂质体（lip）组。分别用rt-pcr和westernblot法检测各组细胞中p62、xpd、p53以及cyclind1的mrna和蛋白质的表达量，并用mtt法检测各组细胞的增殖能力。结果：sirna组中p62的mrna表达较空白对照组、nc组、lip组显著性下调（p＜0.01），sirna组中xpd、p53的mrna表达较其他3组也有明显的下调；而sirna组中cyclind1的mrna表达较其他3组明显的上调。westernblot检测结果显示各组细胞中p62、xpd、p53以及cyclind1的蛋白质表达变化趋势与其mrna变化趋势相一致。mtt检测显示sirna沉默p62后，细胞增殖力增强。结论：p62基因可能通过影响xpd、p53以及cyclind1从而抑制癌细胞生长，并且可能通过dna损伤检控点来调控细胞增殖。