卵巢癌腹水中肿瘤干/祖细胞的筛选及鉴定

？目的：从人卵巢癌腹水细胞中分离肿瘤干/祖细胞并进行鉴定。方法：采用无血清特殊培养法从腹水中分离培养球形体细胞；用流式细胞仪检测腹水球形体细胞（asciticspheroidcells，asc）和腹水细胞（asciticcells，ac）中sp(sidepopulation)亚群含量；采用pcr和westernblot方法测定两种细胞干/祖细胞相关标记物abcg2、oct-4、nanog基因和蛋白的表达；nod/scid小鼠检测其体内致瘤性。结果：腹水球形体细胞和腹水细胞sp亚群分别为0.9%，0.2%；腹水球形体细胞较腹水细胞高表达干/祖细胞相关标记物oct-4、abcg2、nanog；1×104个球形体形成细胞就能在nod/scid鼠中成瘤，而腹水细胞1×106个细胞也不能成瘤。结论：无血清悬浮培养法可以从卵巢癌患者腹水中筛选出肿瘤干/祖细胞。该结果可为今后研究卵巢癌的发生、复发机制及筛选其化疗药物提供简便实用的体外模型。