鼻咽癌肿瘤干细胞高表达sod2可对抗顺铂的杀伤作用

？？目的探讨鼻咽癌(npc)肿瘤干细胞对抗顺铂诱导氧化应激损伤的机制。方法利用cck-8法测定顺铂对npc细胞cne-2与npc肿瘤干细胞cne-2s的半数抑制浓度。观察不同浓度(0.1、0.5、1.0μmol·l-1)顺铂作用后，细胞内活性氧（ros）、总谷胱甘肽（gsh）的含量及总超氧化物歧化酶(sod)的活性改变。实时定量rt-pcr测定1μmol·l-1顺铂作用于2组细胞48h后，谷胱甘肽合成酶（gss）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚基（gclc）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶调节亚基（gclm）、sod1和sod2mrna的表达情况，免疫印迹法检测sod2蛋白的表达情况。利用小干扰rna技术沉默sod2，并与1μmol·l-1顺铂共处理2组细胞，用台盼蓝染色观察细胞的存活情况。结果顺铂对cne-2s的半数抑制浓度显著高于cne-2（μmol·l-1：9.8±1.1vs2.4±0.6，p＜0.05）。在不同浓度的顺铂处理后，2组细胞内ros水平升高，但cne-2s在处理前后的ros水平均低于cne-2（p<0.05）。1μmol·l-1顺铂刺激后，cne-2s与cne-2细胞中gsh含量均上升，但2组细胞间无明显差异（p>0.05）；2组细胞中sod活性均上升，且cne-2s显著高于cne-2（p<0.05）。顺铂处理前后，2组细胞的gss、gclc、gclm和sod1的mrna水平无明显差异，但cne-2s中sod2的mrna及蛋白表达水平高于cne-2（p<0.05）。沉默sod2与顺铂共处理2组细胞，能有效抑制其存活率。结论npc肿瘤干细胞cne-2s高表达sod2后，抗氧化应激能力增强，从而导致对顺铂的耐药。