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天津医药 2014
mir-122靶向调控心肌样细胞诱导分化过程中gata4基因的表达Keywords: 间质干细胞,微rnas,gata4转录因子,3'非翻译区,计算生物学,大鼠,sprague-dawley,mir-122 Abstract: ?【】目的实现大鼠骨髓间充质干细胞(bmscs)向心肌样细胞的诱导分化,并验证分化过程中mir-122靶向调控gata4基因的表达。方法首先,分离培养bmscs,应用5-氮杂胞苷(5-azacytidine)将其诱导分化为心肌样细胞。然后,采用靶基因预测软件miranda和targetscan对mir-122和gata4基因的靶向匹配关系进行预测并通过双荧光素酶报告基因系统鉴定。qrt-pcr检测诱导分化过程中mir-122和gata4的表达。结果诱导分化后的细胞平行排列,紧密相连,形态规则均一,免疫荧光化学显示有心肌肌钙蛋白i(ctni)表达。生物信息学方法预测发现mir-122和gata4基因两者匹配良好,通过双荧光素酶报告基因系统检测发现mir-122能结合到gata4mrna的3′utr并有效抑制其表达。qrt-pcr检测结果表明,mir-122的表达水平与gata4表达呈负相关。结论mir-122能调控心肌样细胞诱导分化过程中gata4的表达。
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