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天津医药 2014
大鼠循环血中血小板和内皮细胞来源微囊泡的检测Keywords: 血小板,内皮细胞,流式细胞术,大鼠,wistar,细胞微囊泡,缺血预适应 Abstract: ?【】目的建立流式细胞术对大鼠循环血中细胞微囊泡(mvs)的检测方法,对心肌缺血预适应(ipc)处理大鼠循环血中血小板来源的mvs(pmvs)及内皮细胞来源的mvs(emvs)进行测定。方法大鼠经腹主动脉取血,枸橼酸钠抗凝,室温下经两步离心得无血小板血浆(pfp)。pfp中分别加入fitc标记的血小板表面标志物cd61单抗或pe标记的内皮细胞表面标志物cd144单抗,采用1μm标准微球做粒径对照,2μm标准微球用于计数,流式细胞仪进行检测。结果3.5%枸橼酸钠与血液按体积比1:4混匀,离心后可得均匀、清亮的上清。pfp中1μm以下粒子信号占全部信号的99%以上。pmvs和emvs分别为cd61阳性和cd144阳性的粒子,直径均小于1μm。ipc处理大鼠循环血中pmvs浓度为4053±1987个/μl,emvs浓度为4870±825个/μl。结论成功建立和优化了流式细胞术测定大鼠循环血中mvs的方法,并通过对ipc处理大鼠循环血中pmvs和emvs的测定对mvs的检测方法进行了验证。
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