兔骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定及dil荧光标记

？目的　探讨兔骨髓间充质干细胞(mscs)体外分离培养、表型鉴定和标记的方法。方法　采用密度梯度离心法及贴壁分离筛选法分离培养mscs；采用免疫细胞化学方法检测细胞表面标志抗原cd29，cd106的表达，进行表型鉴定；dii标记第3代mscs,观察标记效率。结果　体外培养的原代mscs48h内可见少量贴壁细胞，7-8d达到90%汇合；免疫细胞化学方法检测细胞表面标志抗原cd29，cd106为阳性；dii进行细胞标记后,荧光显微镜下见所有mscs均被标记为红色荧光,提示dii标记法敏感性好,标记效率高。结论　此培养方法能在短时间内获得大量mscs,操作简单,成功率高,可以作为培养兔mscs的常规方法，为构建组织工程尿道提供充足的种子细胞，并进一步用于治疗重度尿道下裂、尿道下裂残废和较长的后尿道狭窄等顽症。