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天津医药 2013
新型食物不耐受sigg定量检测方法的构建Keywords: 食物不耐受,特异性igg,酶联免疫吸附试验,生物素-链酶亲和素,鸡蛋 Abstract: ?【】?目的??以检测鸡蛋特异性免疫球蛋白g(sigg)为例,探讨新型食物不耐受的定量检测方法。方法??选择行食物过敏原sigg检测的患者173例,另择健康体检者78例为阴性对照。制备生物素化牛血清白蛋白-链酶亲和素酶标反应板,同时加入生物素化鸡蛋抗原和待检血清,洗涤后再加入酶标记抗人igg,建立一种抗原间接包被-液相反应模式的酶联免疫方法;优化生物素化过敏原和酶标记抗体的浓度,确定反应条件。应用此方法检测血清标本中的sigg。结果??选用生物素化蛋清作为抗原,其最适稀释比例是1∶2000,酶标抗体的最适稀释比例是1∶12000。此方法批内及批间变异系数分别为4.83%~8.55%,4.88%~7.93%;与蟹、牛奶、羊奶等的交叉反应率均<10%;与临床现用食物不耐受sigg检测法有较好的相关性(=0.977x+8.45,r=0.961,p<0.05)。结论??本检测方法可用于检测鸡蛋不耐受患者血清sigg,操作简便,具有较高的准确性和特异性,重复性好,并显示较好灵活性潜能,为今后研制“个性化”随机组合食物品种的检测试剂盒奠定基础。
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