xpd和p53对hepg2.2.15增殖及乙型肝炎病毒x蛋白表达的影响

？摘要目的：探讨人着色性干皮病基因d(xerodermapigmentosumd,xpd)和p53对人肝癌细胞株hepg2.2.15增殖及乙型肝炎病毒x蛋白(hepatitisbvirusxprotein,hbx)、bcl-2和bax基因表达的影响。方法：用脂质体转染法将重组质粒pegfp-n2/xpd和空载质粒pegfp-n2转染hepg2.2.15细胞，转染后第2天给予20μm的pifithrin-α（p53抑制剂）孵育24h。实验分为5组：（1）空白对照组；（2）pegfp-n2组；（3）pegfp-n2/xpd组；（4）pegfp-n2/xpd+pifithrin-α组；（5）pifithrin-α组。用rt-pcr和westernblotting检测xpd、hbx、bcl-2和bax表达的变化；用mtt法观察细胞增殖活力；用流式细胞仪检测细胞周期。结果：rt-pcr和westernblotting检测发现，重组质粒pegfp-n2/xpd的转染使得xpd表达增高（p均<0.001）；xpd表达增高使得hbx和bcl-2表达降低，同时使得bax表达增高，而pifithrin-α能抑制xpd这一作用（p均<0.01）。mtt结果显示，xpd表达增高抑制了细胞增殖活力，而pifithrin-α能抑制xpd降低细胞活力的作用（p均<0.001）。流式细胞仪结果显示，xpd表达增高引起了细胞g1期增加、s期减少，而pifithrin-α能抑制xpd这一作用（p均<0.001）。结论：xpd是通过p53途径抑制肝癌细胞增殖的；xpd可通过p53途径下调hbx和bcl-2的表达并上调bax的表达；xpd、p53和hbx三者之间能相互作用、相互影响，共同调节肝癌的发生与发展。