青蒿琥酯抑制人头颈部鳞状细胞癌增殖及诱导凋亡的机制

？：目的探讨天然小分子化合物青蒿琥酯（akt）通过诱导人头颈部鳞癌细胞凋亡而抑制肿瘤生长的分子机制。方法培养人头颈部鳞癌细胞系um-scc-10a，利用四甲基偶氮唑蓝（mtt）法检测akt半数抑制浓度（ic50）；在荧光显微镜下观察不同浓度（0、2.5、5、10、20、40μmol/l）akt对细胞形态的影响；流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况；免疫印迹（westernblot）分析akt诱导凋亡相关蛋白和细胞周期调节因子表达水平的变化。结果akt对um-scc-10a细胞的生长有明显抑制作用，且生长抑制率随药物浓度增加而增加；当akt处理细胞48h时，ic50为15.01μmol/l。荧光显微镜下，使用细胞核染料hoechst33258观察到细胞核内出现凋亡小体；流式细胞仪分析显示akt诱导细胞周期阻滞在g1期，细胞出现大量凋亡；westernblot结果显示p53、p21蛋白表达量上调、细胞周期蛋白d（cy?clined）下调；线粒体途径诱导的bcl-2相关x蛋白（bax）、细胞色素c（cytochromec）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）表达上调，b细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、procaspase-3表达下调，线粒体膜电位降低。结论akt经由线粒体途径诱导um-scc-10a细胞凋亡，阻滞细胞周期于g1期，进而抑制肿瘤细胞增殖。