|
天津医药 2015
microrna-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响, PP. 1137-1140 Keywords: 肺纤维化,成纤维细胞,转化生长因子β1,微rnas,细胞增殖,细胞分化,adamts-1,microrna-21 Abstract: ?:目的探讨小鼠肺成纤维化细胞模型中microrna(mir)-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响。方法24只spf级c57bl/6小鼠随机分为假手术组和肺纤维化模型组,各12只。经气管内注入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型,采用荧光定量pcr检测各组肺组织mir-21的表达。提取小鼠成纤维细胞,胰酶消化,接种于6孔板,使细胞浓度达到30%~50%。设随机对照组、空白对照组和mir-21mimic组。各组分别在50μlopti-mem加入2.5μlpbs、阴性对照储存液和mir-21mimic储存液(20μmol/l)。采用细胞计数试剂盒-8(cck-8)法检测细胞增殖活性,蛋白质印迹法检测成纤维细胞含ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(adamts-1)和转化生长因子(tgf)-β1的表达。结果与假手术组比较,肺纤维化模型组小鼠肺组织中mir-21的表达量明显上调。与随机对照组和空白对照组比较,mir-21mimic组成纤维细胞mir-21基因表达显著上调,成纤维细胞增殖率增加,adamts-1蛋白表达明显下降,而tgf-β1表达显著上调;空白对照组与随机对照组adamts-1及tgf-β1蛋白表达无明显差异。结论在小鼠肺成纤维化细胞模型中上调的mir-21可通过?adamts-1/tgf-β1信号通路促进肺纤维化。
|