逆转录病毒载体介导的口蹄疫病毒衣壳前体基因和绿色荧光蛋白基因在bhk-21细胞中的表达

？为建立逆转录病毒载体介导的口蹄疫病毒衣壳前体蛋白哺乳动物细胞表达体系，将口蹄疫病毒(fmdv)衣壳前体基因(p1)和绿色荧光蛋白基因(egfp)依次插入逆转录病毒载体pbabepuro构建重组逆转录病毒载体pbabepuro-p1-2a-egfp。将重组逆转录病毒载体和pvsv-g质粒载体共转染gp2-293包装细胞，用产生的重组逆转录病毒感染幼仓鼠肾细胞（bhk-21）。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达，用嘌呤霉素筛选抗性细胞，间接免疫荧光方法检测细胞中fmdv衣壳前体蛋白的表达。结果表明，重组逆转录病毒载体pbabepuro-p1-2a-egfp构建正确，绿色荧光蛋白和fmdv衣壳前体蛋白在细胞中能稳定表达。fmdv衣壳前体蛋白基因细胞表达体系的成功建立为进一步开展口蹄疫亚单位疫苗的研制奠定了基础。