tsol18基因密码子优化对其表达及重组蛋白免疫效果的影响

？定点突变猪带绦虫六钩蚴（oncosphere）tsol18基因的4个碱基，并截去其n端16氨基酸信号肽的编码序列，构建pgex-tsol18-sp表达载体，iptg诱导表达后进行产物的sds-page、westernblot及稳定性分析；取该基因修饰前、后所表达的重组蛋白免疫猪，以elisa检测抗体水平，并通过屠宰检虫评价、比较免疫效果。结果显示：修饰后的tsol18-sp基因共有7个碱基发生同义突变，表达产物主要是约38.7ku的可溶性融合蛋白，在4℃保存2个月后约降解20.1%，能与猪带绦虫六钩蚴阳性血清反应；tsol18和tsol18-sp抗原免疫试验猪后均能诱导高水平抗体的产生，但tsol18-sp抗原的保护率较tsol18抗原有明显的提高（100%vs20%）。表明tsol18经修饰后，其重组表达产物的生物学活性和稳定性都有很大改善，可作为囊虫病免疫预防的候选抗原。