一株无血凝性兔出血症病毒的分离鉴定及其衣壳蛋白vp60基因的克隆和序列分析

？从临床病料中分离鉴定出1株无血凝性的致病性兔出血症病毒(rhdv)，命名为yaan-1。ha试验测得该毒株原代及经兔体传3代后的肝毒在25℃、37℃和4℃时均无血凝性；但在琼脂扩散试验和对流免疫电泳中均可见分离株与常规rhdv高免血清形成清晰的沉淀线；电镜观察可见30nm左右的病毒粒子。采用rt-pcr方法将yaan-1株的衣壳蛋白vp60基因进行了克隆测序，序列分析表明vp60基因序列全长1740bp，编码579个氨基酸，测序结果提交genbank（注册号为dq069280），并与世界各国的常规rhdv分离株进行比较，结果表明核苷酸同源性为90.0%～98.0%，氨基酸同源性为94.1%～99.0%，氨基酸变异多发生在衣壳蛋白c、e区；同时对yaan-1株的分子量、等电点、疏水性、跨膜区等分子结构特征进行了分析。本研究首次报道了无血凝性rhdv中国分离株，丰富了地方毒株资源，为明确我国地方株的分子流行病学，以及对vp60蛋白分子特征研究提供了新材料。