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ISSN: 2333-9721
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素ⅰ抗原模拟表位的筛选与鉴定

, PP. 1073-1077

Keywords: 噬菌体随机肽库,模拟表位,猪胸膜肺炎放线杆菌,外毒素ⅰ

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Abstract:

?将猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素ⅰ(appapxⅰ)抗血清用饱和硫酸铵分级粗提后,再经deae-sephadex-a50低压层析系统纯化得到igg,用此igg作为配基对噬菌体随机十二肽库进行4轮不同条件的富集筛选。通过改变筛选条件,噬菌体的回收率从1.44×10-6增加到了8.9×10-5,p/n值逐步提高,阳性噬菌体得到了富集。elisa结果表明,随机挑取的10个噬菌体克隆中,有5个与纯化的igg有较强的特异性结合能力。对筛选到的5个阳性克隆提取ssdna进行测序,并对其递呈的氨基酸序列进行分析。结果有3个克隆的4个连续的氨基酸序列(rvdv)相同,并与appapxⅰ蛋白的原始序列具有较高的同源性。

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