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牲畜兽医学报 2013
干涉鸡热休克蛋白70基因表达诱导鸡胚成纤维细胞凋亡Keywords: 热休克蛋白70,rna干涉,鸡胚成纤维细胞,凋亡,半胱氨酸蛋白酶 Abstract: ??为研究鸡热休克蛋白70(hsp70)与细胞凋亡的相关性及分子机制,通过构建表达靶向鸡hsp70的短发夹样结构小干扰rna(shrna)质粒载体,转染鸡胚成纤维细胞(cef),干涉后18、24、28h用annexinv-fitc方法检测干涉hsp70表达后细胞凋亡情况,同时用荧光定量rt-pcr测定凋亡相关基因caspase3和caspase8的表达水平。结果显示,与未干涉组相比,干涉组hsp70被分别敲低了75%、83%和96%,凋亡细胞数随着干涉时间的延长而增加,caspase3表达水平升高,其表达量分别上调至250%、140%和110%,caspase-8表达水平下降,其表达水平分别下降至76%、80%和34%。由此可见,鸡的hsp70可能主要通过线粒体途径保护cef对抗凋亡。
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