猪2型圆环病毒核酸疫苗免疫效应研究

？pcr扩增pcv2orf2和bvp22基因。将orf2基因克隆入真核表达载体pcdna3.1（+），构建了pcorf2作为核酸疫苗免疫小白鼠。同时将具有蛋白转导功能的bvp22基因分别克隆到orf2基因的上游和下游，使二者融合表达，命名为pcorf2bvp22和pcbvp22orf2。分4组肌肉免疫balb/c小白鼠，分别注射pcdna3.1（+）、pcorf2、pcorf2bvp22和pcbvp22orf2，共免疫2次，间隔2周，分别于首免后2周和二免后4周采血，elisa法检测体液抗体。同时为在体外验证orf2和bvp22基因的真核表达，将orf2和bvp22基因分别克隆入pegfp-n1载体，构建了pnorf2和pnbvp22，转染hela细胞后在荧光显微镜下观察到了orf2和bvp22在体外的瞬时高效表达。结果显示，通过两次免疫后，各疫苗组均产生了针对orf2的体液抗体，同时证明bvp22可增强核酸疫苗的免疫效果，其中以bvp22在orf2上游效果更好。本研究为防制猪2型圆环病毒感染提供了较为理想的侯选疫苗。